Primerverlängerung ist eine Technik, mit der die 5'-Enden der RNA kartiert werden können - das heißt, sie können sequenziert und richtig identifiziert werden.

Die Primerverlängerung kann verwendet werden, um die Startstelle der Transkription (die Endstelle kann mit dieser Methode nicht bestimmt werden) zu bestimmen, unter der ihre Sequenz bekannt ist. Diese Technik erfordert einen radioaktiv markierten Primer (normalerweise 20 - 50 Nukleotide lang), der zu einer Region nahe dem 3'-Ende der mRNA komplementär ist. Man lässt den Primer an die RNA binden und die reverse Transkriptase wird verwendet, um cDNA aus der RNA zu synthetisieren, bis sie das 5'-Ende der RNA erreicht. Durch Denaturierung des Hybrids und Verwendung der verlängerten Primer-cDNA als Marker auf einem elektrophoretischen Gel ist es möglich, die Transkriptionsstartstelle zu bestimmen. Dies erfolgt gewöhnlich durch Vergleichen seiner Position auf dem Gel mit der DNA-Sequenz (z. B. Sanger-Sequenzierung), vorzugsweise unter Verwendung desselben Primers auf dem DNA-Matrizenstrang. Das genaue Nukleotid, bei dem die Transkription beginnt, kann durch Abgleichen des markierten verlängerten Primers mit dem Markernukleotid bestimmt werden, die beide den gleichen Migrationsabstand auf dem Gel teilen.

Die Primerverlängerung bietet eine Alternative zu einem Nuklease-Schutz-Assay (S1-Nuklease-Mapping) zur Quantifizierung und Kartierung von RNA-Transkripten. Die Hybridisierungssonde für die Primerverlängerung ist ein synthetisiertes Oligonukleotid, während die S1-Kartierung die Isolierung eines DNA-Fragments erfordert. Beide Methoden liefern Informationen über den Beginn einer mRNA und liefern eine Schätzung der Konzentration eines Transkripts anhand der Intensität der Transkriptbande auf dem resultierenden Autoradiogramm. Im Gegensatz zur S1-Kartierung kann die Primerverlängerung jedoch nur zum Lokalisieren des 5'-Endes eines mRNA-Transkripts verwendet werden, da die für den Assay erforderliche DNA-Synthese auf der reversen Transkriptase beruht (polymerisiert nur in der 5'- → 3'-Richtung).

Die Primerverlängerung wird von Spleißstellen nicht beeinflusst und ist daher in Situationen vorzuziehen, in denen dazwischenliegende Spleißstellen die S1-Zuordnung verhindern. Schließlich ist die Primerverlängerung genauer als die S1-Kartierung, da die bei der S1-Kartierung verwendete S1-Nuklease die Enden des RNA-DNA-Hybrids "abknabbern" oder die einzelsträngigen Regionen nicht vollständig abbauen kann, wodurch ein Transkript entweder kürzer oder länger erscheint.

Anwendung

2 Schichten auftragen. Die erste Schicht kann 25% verdünnt mit Wasser aufgetragen werden, um den Fluss und die Deckkraft zu erhöhen, falls erforderlich. Tragen Sie die zweite Schicht auf, sobald die erste Schicht trocken ist (ca. 1 Stunde). Dieses Produkt kann angewendet werden auf: Leinen, Holz, MDF und anderen Trägern, um einen starken, flexiblen, dauerhaften, hochpigmentierten weißen Untergrund zu erzeugen. Geeignet als Untergrund für Acryl- und Ölfarben.

Kann sogar auf preiswerten, standardgrundierten Leinwänden aufgetragen werden, um sie nicht saugfähig zu machen!

Nicht auf Kaninchenhaut / Fellkleber oder auf unsaubere Unterlagen wie Pappe oder dünne Unterlagen auftragen!

Ungiftig
Entspricht ASTM D 4236
PW 6 Titanweißpigment, dispergiert in Acrylharz

Das Aufkommen von Acryldispersionsgrundierungen

Künstler halten es heute für selbstverständlich, dass es einige Produkte immer gab. Dies ist nicht der Fall bei Acrylfarben und insbesondere bei Acryl-Gessos für Künstler. Während es sich bei Acryl-Gessos nicht um echte Gessos handelt, die formal als eine Mischung aus Gips und Tierleim mit dem richtigen Wasseranteil definiert sind, um eine harte, aber saugfähige Grundlage für das Malen zu schaffen, ist der Begriff „Gesso“ heute ein Teil der Umgangssprache für alle Untergrund oder Grundierung zur Vorbereitung einer harten Oberfläche oder eines Gewebesubstrats, mit dem Künstler ein Kunstwerk schaffen.

Die Acrylgrundierung löste eine Revolution bei der Herstellung von Malgrundlagen aus. Bevor es Acryldispersionsgrundierungen gab, mussten sich Künstler auf Ölgrundierungen für Leinwand oder traditionelles Gesso stützen, die auf eine feste Oberfläche wie eine Holzplatte oder Hartfaserplatte aufgetragen wurden. Beide Grundierungsmethoden lieferten vor dem Aufkommen der Acrylgrundierung ein einzigartig unterschiedliches Erscheinungsbild für den Farbauftrag. Acrylgrundierungen würden die Denkweise ändern, indem ein neues Mitglied in die Familie der traditionellen Grundierungsmaterialien aufgenommen würde.

Acrylgrundierungen konnten im Vergleich zu Ölgrundierungen mit bemerkenswert kurzen Trocknungszeiten aufgebracht werden. Sie brauchten nicht zu messen, zu heizen. Mischen oder die Notwendigkeit, rohe Zutaten zu sammeln, um vorzubereiten.

Behälter mit Liquitex Acrylgrundierung

Die Acryl-Revolution war das Ergebnis der Einführung neuer Produkte in der kommerziellen Farbenindustrie. Praktisch alle Veränderungen in der Welt der Kunststoffe sind das Ergebnis von Forschung und Entwicklung in der kommerziellen Farbenindustrie. Der mutige Schritt, ein kommerzielles Acrylmaterial zu nehmen und Farben, eine Grundierung und verschiedene Medien herzustellen, war das Ergebnis der Vision eines Mannes.

Henry Levinson produzierte seit 1933 Ölfarben unter der Marke Permanent Pigments mit Sitz in Cincinnati, Ohio. Bis 1955 hatte er ein Acrylpolymer als Quelle für eine neue Form von einfach zu verwendender Farbe auf Wasserbasis ausgewählt, die er in eine Grundierung verwandelte, die auf eine Vielzahl von Substraten aufgetragen werden konnte, um sie in eine zu verwandeln kompatible Oberfläche für Öl- oder Acrylfarben. Eines der einzigartigen Merkmale ist, dass Acrylgrundierungen kein Öl enthalten, sodass Träger wie Leinwand nicht mit einer Deckschicht versehen werden müssen, um zu verhindern, dass der Untergrund den Stoff oxidiert und zerfällt.

Die erste Werbung erschien in American Artist Magazine im Februar 1957 als ein Drittel der Seite Spalte. Es zeigte das unverwechselbare Permanent Pigment-Logo und einen Metallbehälter, der einer modernen Farbdose ähnelt und das Produkt zeigt. Die Anzeige zeigte, dass andere Materialien, die Acryl enthalten, eine Produktfamilie bilden, die der Welt als "Liquitex" bekannt ist, eine Kombination der Wörter "flüssig" und "Textur". Levinson würde eine zweifache Mission vor sich haben. Zu diesem Zeitpunkt waren Acrylfarben, insbesondere handelsübliche Produkte auf Wasserbasis, neu auf dem Markt. Levinson musste seine Käufer von Kunstmaterialien davon überzeugen, dass dieses neue Medium keine Spielerei, sondern die Zukunft der Farbe war. Levinson musste auch eine komplette Produktlinie vorstellen, die Künstler benötigen würden, um Gemälde zu schaffen. Der Begriff "Acrylpolymer" war in der Kunstwelt so neu, dass Levinson den Begriff "Latex" in Klammern nach den Worten "Acrylpolymer" verwenden musste, um sein neues potentielles Publikum zu erziehen, obwohl in Acrylfarbe oder kein echtes Latex enthalten war Grundierungsprodukte.

Weiteres Marketing und Werbung waren die ersten mutigen Schritte, die Levinson und andere große Hersteller unternahmen, um Acrylfarben und -medien einzuführen und zu etablieren. Für die frühen Hersteller von Acryl waren ihre Versuche eine Reihe von Triumphen und Tragödien. Viele Erdfarben koagulierten buchstäblich in der Tube, während andere Farben weich, cremig und leicht zu handhaben waren. Mit der Zeit und der Erfahrung wurden die Mängel, die durch die Wechselwirkung von Pigmenten mit dem Acrylbindemittel und anderen Bestandteilen verursacht wurden, alle überwunden. Kunststoffe sind heute eine stabile Alternative zu anderen Lacksystemen. Künstler haben die einzigartigen Arbeitseigenschaften von Acryl verstanden und genutzt, um das Vokabular des künstlerischen Ausdrucks zu erweitern.

Medien Gallerie

Die Wahl einer geeigneten Acrylgrundierung ist sehr wichtig. Dies kann der Unterschied sein zwischen einem jahrelangen Anstrich oder dem Aufwand, in der Hälfte der Zeit neu zu streichen.

Acrylfarbengrundierungen sind äußerst vielseitig und wirtschaftlich geworden.

Diese Grundierungen sind im Allgemeinen einfach zu verwenden, trocknen schnell und bleiben für längere Zeiträume flexibel. Sie widerstehen Rissen, Schälen und Blasenbildung und lassen sich leicht mit Wasser und Seife reinigen.

Nicht alle Primer sind gleich. Einige Hersteller verwenden modifizierte Harze, die billiger und schlechter sind und im Allgemeinen als Latexprimer bezeichnet werden. Die besten Grundierungen verwenden 100% Acrylharze und kosten mehr.

Herstellung einer Acrylfarbengrundierung

Dieser Artikel befasst sich mit den Materialien und der Verarbeitung, die zur Herstellung einer einfachen, lösemittelbasierten Acryl-Schnelltrocknungsgrundierung verwendet werden. Die beste Anwendung ist das Sprühen mit einer Spritzpistole oder einem Farbspritzgerät. Sie kann jedoch auch mit einem Pinsel aufgetragen werden, wenn verschiedene Lösungsmittel verwendet werden.

Acryl-Grundierungstypen

Universelle Grundierung / Versiegelung - Entwickelt für den Einsatz auf vielen verschiedenen Innen- und Außenflächen. Wie Holz, Metall, unbemalter Trockenbau, Mauerwerk, unbemalter Putz, Ziegel, Fliesen usw. Für viele Innenanwendungen ist Holz im Außenbereich nur punktuell zu grundieren.

Fleckblockierende Grundierung - Grundiert und versiegelt effektiv viele wasserlösliche Flecken wie Rauch, Lippenstift, Buntstift, Fett und Tannin, die aus Redwood oder Zeder stammen. Viele Produkte können sowohl auf Innen- als auch auf Außenflächen eingesetzt werden.

Grundierung für Mauerfarben - Formuliert, um einen hoch alkalibeständigen Film zu bilden, der die Deckbeschichtungen vor Kalkbrand, Verfärbung und Ausblühungen schützt. Entwickelt für den Einsatz auf vorschriftsmäßig ausgehärteten, unbemalten oder neuen Beton-, Mauerwerk-, Stuck- und Putzoberflächen.

Block füllen - Wird auf neuen, unbemalten, glatten oder geteilten Betonblöcken verwendet. Füllt die Poren und bereitet die Oberfläche für den Endanstrich vor. Hoch alkalibeständig formuliert. Typischerweise viel dicker als jeder andere Primertyp.

Emaille Unterwolle - Eine Grundierung mit hoher Deckkraft für lackierte und unbemalte Innenflächen. Leicht zu schleifen, sorgt für eine glatte Oberfläche. Ideal zum Versiegeln von Holzverkleidungen und Türen vor dem Auftragen von Emaille.

Bereiten Sie die Acrylharzlösung in Lösungsmittel vor

Für den Primer wird eine Mischung aus 30% (Gew./Vol.) Lösung von Paraloid B48N in einer Mischung aus Xylol und Aceton in einem Verhältnis von 3: 2 hergestellt. Das von mir gewählte Gesamtvolumen betrug 250 ml. Um eine Lösung mit 30% Gewicht pro Volumen herzustellen, muss das Gewicht des Feststoffanteils berechnet werden. Nehmen Sie 30% von 250, um eine Masse von 75 Gramm zu erhalten. Das Volumen von 250 ml entspricht dem Gesamtvolumen des in Lösungsmittel gelösten Harzes. Es wird daher empfohlen, mit einer etwas geringeren Lösungsmittelmenge als erforderlich zu beginnen, da später mehr Lösungsmittel hinzugefügt werden kann, um das richtige Volumen aufzufüllen.

Polymere wie Acrylharz haben große Molekulargewichte und benötigen eine beträchtliche Zeit, um sich in einem aktiven Lösungsmittel aufzulösen. Salz und Zucker bestehen aus viel kleineren Molekülen und lösen sich relativ schnell in Wasser auf. Um dieser langsameren Auflösungsrate Rechnung zu tragen:

  1. Machen Sie aus dem Harzgranulat einen Beutel mit einem Stück Käsetuch, das an einem Ende mit einer durchsichtigen Angelschnur zusammengebunden ist.
  2. Stanzen Sie ein Loch durch den Deckel des Mischbehälters.
  3. Führen Sie die Angelschnur durch dieses Loch, bis der Boden des Beutels das Lösungsmittel berührt.
  4. Das Lösungsmittel benetzt die Partikel sofort und bald vereinigt sich das Granulat zu einem klebrigen Gel, das allmählich in das Lösungsmittel abfließt und dessen Viskosität erhöht.
  5. Überprüfen Sie regelmäßig, bis die Tasche leer ist. Dies kann 24 bis 48 Stunden dauern. Regelmäßige Überprüfung des Fortschritts mit ein wenig Wirbeln und Schütteln kann helfen.

Trockene Pigmentmischung für Primer

Die trockene Grundierungsmischung wird aus gleichen Gewichten der folgenden Verbindungen hergestellt: Calciumcarbonat (Kreidepulver), Talk und Titandioxid. Diese drei Pigmente verleihen einer Beschichtungsmischung vorteilhafte Eigenschaften wie Zahn, Korrosionsschutz, Deckvermögen und Schleifbarkeit.

  • Kalziumkarbonat, auch als Kreide oder Wittling bekannt, ist ein feines weißes Pulver, das in Gips und zur Herstellung von Kreidefarben verwendet wird. Calciumcarbonat ist leicht alkalisch und verlangsamt das Rosten von Stahl. In dispergiertem Zustand etwas durchscheinend, lässt sich aber leicht schleifen,
  • Talk ist ein weißes Pigment und Füllstoff, das aufgrund seiner plattenartigen Struktur auch die Korrosion verlangsamt. Dieses Pigment hilft beim Dispergieren anderer Pigmente und macht den Primer leicht schleifbar.
  • Titandioxid ist ein sehr opakes Weißpigment, das Lackierungen ein gutes Deckvermögen verleiht. Dies ist wichtig, wenn Sie eine vorhandene Lackierung übermalen und die Farbe drastisch ändern.

Trockene Pigmentmischung zur Harzlösung geben

  • Verwenden Sie einen kleinen Farbmischer, der in einer Tischbohrmaschine installiert ist.
  • Während des Laufens wird in der flüssigen Mischung ein Wirbel erzeugt, und das Pigment wird allmählich mit einem Sichter zugesetzt, um die Bildung großer Klumpen von Pigmenten zu verhindern.

Ein Minisieb zum Auftragen von Emails wurde verwendet, weil es die richtige Größe hatte. Für diese Zubereitung wurden 15 g Gesamtpigment zugegeben.

Gründliches Rühren erforderlich

Nachdem das Pigment in das Harz gesiebt worden war, wurde die gesamte Mischung gerührt und weitere 10 Minuten gerührt. Dies wurde durchgeführt, um zu verhindern, dass sich Pigmentagglomerate neu bilden, und um mehr Pigment in der Mischung dispergiert zu halten.

Gedanken und Beobachtungen

Dies war eine Lernerfahrung, aber insgesamt sehr angenehm. Zu Beginn habe ich der Harzlösung nicht annähernd genug Pigmentmischung zugesetzt und den Primer mit dem mechanischen Rührer nicht ausreichend gemischt. Ich habe meine Fehler in diese Vorbereitung aufgenommen, um diejenigen zu unterstützen, die möglicherweise Fehler in ihrem Prozess beheben.

Diese Grundierung trocknet sehr schnell und Decklacke werden zu einem späteren Zeitpunkt aufgetragen. Drei Materialien wurden letztendlich getestet: druckbehandeltes Holz, warmgewalzter Stahl und Aluminiumblech für Flugzeuge der Güteklasse 2024.

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